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00.复习清单14 ​

1 ​

醋酸菌是嗜氧菌 + 嗜热菌。

http://localhost:5173/gaozhong/06_生物/01_一轮(夏季)/14_发酵工程/1-传统发酵技术的应用/1-果酒和果醋的制作.html#_1

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2 ​

  • 制作腐乳时：让豆腐上长出毛霉时，将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度
  • 制作果酒时：适宜温度范围是 18-30，最适是 28
  • 制作果醋时：适宜温度范围是 30-35

豆蔻少女：15-18

年轻女人：18-30

成熟女人：30-35

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3 ​

  • 毛霉为好氧型真菌，为避免缺氧，放豆腐时要留出一定缝隙
  • 加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分并且抑制微生物的生长
  • 加卤汤装瓶后，卤汤可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用，此时毛霉不会继续增殖
  • 在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐增加盐的用量，因为越接近瓶口被杂菌污染的机会越大

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4 ​

  • 发酵初期，由于硝酸盐还原菌的作用使亚硝酸盐增加；发酵中期，硝酸盐还原菌受抑制，部分亚硝酸盐被分解含量下降；发酵后期，硝酸盐含量下降至相对稳定

http://localhost:5173/gaozhong/06_生物/01_一轮(夏季)/14_发酵工程/1-传统发酵技术的应用/3-泡菜的制备.html#_1

5 ​

  • 泡菜坛子内长出白膜，原因是：密封不严，导致产膜酵母菌大量繁殖。

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6 ​

  • 某同学欲从新鲜的泡菜滤液中分离纯化某种乳酸菌，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，原因是
    • 滤液中乳酸菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落。
  • 计算稀释倍数：picgo-2026-03-04-18-16-33

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7 ​

  • 对培养基灭菌的方法是湿热灭菌法
  • 为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌

http://localhost:5173/gaozhong/06_生物/01_一轮(夏季)/14_发酵工程/2-微生物的培养技术及应用/1-培养基.html#_1

8 ​

  • 尿素在脲酶的作用下生成 NH₃和 CO₂，NH₃溶于水后生成 NH₄⁺，可为微生物的生长繁殖提供氮源
  • 尿素分解菌的碳源为葡萄糖，而不是 CO2

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  • 倒平板，这里的倒是 四 声，意思是倒入培养基液体到平板中。不是倒置平板的意思。

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  • 平板划线法划线处的菌落可能由同一个细菌或多个细菌繁殖而来的子细胞群体
  • 为保证无菌操作，接种针在使用前都必须经过灼烧灭菌
  • 如果要在培养基中加入某些可以鉴定菌种的物质，应该在灭菌后未凝固时加入该物质。比如碳酸钙能被乳酸菌分泌的乳酸分解，那么无菌碳酸钙应该在灭菌后未凝固的培养基中加入，充分混合均匀后倒平板。

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  • 图中 5 支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在 30~300 的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为 R= （C÷V）×M。（C 为平均菌落数，V 为涂布液体积，M 为稀释倍数）。求得的 R 表示 1 克土壤含有的菌落数。
    • picgo-2026-03-04-21-54-45
  • 设置重复组，增强实验的说服力与准确性，故某一稀释度下至少涂 3 个平板。稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低
  • 将 10g 土样加到 90mL 无菌水中定容至 100mL 后，此时土样稀释倍数为 10 倍，再经 3 次 10 倍稀释得到 3 号试管中的样品，故 3 号试管中样品的稀释倍数是104倍。
    • 因为 10g 加入倒 90mL 无菌水中，相当于质量增大了 10 倍，所以是稀释了 10 倍。
  • 要判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基在相同培养条件下作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落类型，则说明选择培养基起到了选择作用

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  • 倒平板的培养基需要先调节 pH 后灭菌

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  • 培养基分为鉴别培养基和选择培养基，区别是
    • 选择培养基：只允许特定微生物生长繁殖
    • 鉴别培养基：具有基本的营养物质 + 指示剂或显色剂。比如：
      • 大肠杆菌 + 伊红美蓝 -> 黑色菌落
      • 尿素分解菌 + 酚红 -> 红色环带
      • 纤维素分解菌 + 刚果红 -> 透明圈

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  • 以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基，在该培养基上只有能分解尿素的微生物能够生存

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  • 培养基中的石油在菌株 M、N 生长繁殖时起到选择作用，琼脂是凝固剂不能起到选择作用

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  • 刚果红 (CR) 可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不和纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红 —— 纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌
  • 在进行纤维素分解菌的培养时，常进行选择培养，进行选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能从样品中分离得到所需的微生物；而不是获得纤维素分解菌的菌落。
  • 当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红 —— 纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌
    • picgo-2026-03-04-22-24-19
  • 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则表明筛选到了分解尿素的细菌
    • 因为尿素会分解为 NH3 和 CO2，NH3 遇水形成氨水呈现碱性，酚红遇碱变红。

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  • 果酒和泡菜的发酵都利用了微生物中参与呼吸作用的酶，这些过程发生在细胞内
  • 参与腐乳发酵的主要微生物是毛霉，其代谢类型为异养需氧型
  • 传统发酵技术制作泡菜和果酒利用的是植物体表面附着的天然菌种，不需要人工接种。
    • 泡菜加“老汤”，是为了缩短发酵周期,不加也是可以的。

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18 ​

  • 酿酒过程中，把糯米蒸熟待其冷却。目的是为了降低温度，防止杀死酵母菌。而不是为了保证酒精发酵的最适温度。
  • 当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸

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19 ​

  • 酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供碳源，有利于提高酒精的生成量

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  • 豆豉、霉豆腐的发酵菌种都是霉菌。
    • 发酵过程中多种酶系将原料中的蛋白质、脂肪等分解为小分子，如可将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸
  • 调味过程中添加盐、白酒和风味料均可起到抑制杂菌生长的目的，如盐分可通过使微生物渗透失水死亡而达到抑菌作用，同时起到调节口味的作用

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21 ​

  • 制作辣椒胚时加入白酒的目的是利用白酒杀菌，同时增加风味

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  • 主发酵是酵母活跃、糖分快速转化为酒精和二氧化碳的阶段，而后发酵则是风味细化、酒体成熟和残糖缓慢转化的阶段。

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23 ​

  • 使用液体培养基，目的是为了扩大培养，获得更多菌种
  • 使用高压蒸汽灭菌锅时，若冷空气没有排除充分，则可能压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，从而影响灭菌效果
  • 发酵罐中发酵是发酵工程的中心环节，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程
  • 采用过滤、沉淀等方法将产黄青霉菌分离和干燥，即可得到菌种；青霉素是青霉菌的代谢产物，在发酵后应采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品

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24 ​

  • 配置固体培养基时，还需加入琼脂，且应先调 pH 再灭菌
  • 培养基应在压力为 100kPa、温度为 121℃的条件下灭菌 15~30min，该灭菌方式为高压蒸汽灭菌
  • 菌体分解纤维素的能力越强，菌落周围形成的透明圈越大，向培养基中加入刚果红后，菌落直径 / 透明圈直径 （注意是比值）的值越大的菌说明分解纤维素的能力越弱

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25 ​

  • 用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至 50℃左右开始倒平板操作（温度低了，培养基就凝固了，倒不出来了）
  • 用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率，但不能分离出目的菌

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26 ​

注意稀释倍数的计算。

  • 1mL 加入倒 99mL，是稀释 100 倍；
  • 10mL 加入到 90mL，是稀释 10 倍。
  • 0.5mL 加入倒4.5mL，是稀释 10 倍，而不是 5 倍。

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27 ​

  • 与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行，这是因为酒精灯火焰旁存在无菌区域，能够减少杂菌污染
  • 将完成过滤之后的滤膜紧贴在 EMB 培养基上，能将菌种接种于培养基上，即这属于微生物培养中的接种操作
  • 培养基通常采用高压蒸汽灭菌法灭菌法，是湿热灭菌的一种
  • 为检测该培养基灭菌是否彻底，一般将未接种的培养基在恒温箱中培养 1～2d，观察是否有菌落产生，若有菌落产生，则证明灭菌不彻底

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28 ​

  • 为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌处理，接种后需要将培养皿倒置 培养
  • 接种前进行的一系列稀释操作，目的是 在固体培养基表面形成单个菌落。（或者利用稀释涂布平板法培养出微生物的单个菌落，达到纯培养的目的）
  • 微生物的纯培养：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形 成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过 程就是纯培养。 得到某一优质菌株，要对其长期保存，应该采用 甘油管藏法 在 -20摄氏度 的冷冻箱中保存。

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29 ​

  • 接种后的平板应该置于 恒温培养箱 中培养。

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30 ​

  • 将一个未接种的平板同时放在恒温培养箱中培养，其目的是作为空白对照，判断培养基本身是否被杂菌污染

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  • 平板划线法应该是只用接种环蘸取一次菌种液体，然后不断划线稀释。
距离 2026 高考还有 0 天。

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